荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer, FRET)

时间:2022-04-06浏览次数:1064

对于较长的序列,森尔生物建议使用 FRET pairs (fluorescence resonance energy transfer pairs)进行修饰。 

 荧光共振能量转移(FRET)是描述两个荧光团之间的能量转移的机制。由于FRET效率部分基于供体和受体分子之间的距离,因此该技术通常用于研究酶效率,蛋白质 - 蛋白质相互作用或其他分子动力学。

Fret1.png

                                                                       (当肽保持完整时,受体分子将淬灭供体分子,并且不会检测到荧光。如果序列被蛋白酶活性切割,则受体将不再淬灭供体,并且将检测到荧光信号)


以下为森尔生物常见的Fret多肽供体和受体组合

Fret2.png


FRET肽是研究肽酶特异性的便利工具,由于其反应过程可被连续监测,为酶活性的检测提供了一个便捷的方法。供体/受体对的肽键水解后产生的荧光可衡量纳摩尔级浓度的酶活性。当FRET肽是完整的,表现出的是内部的荧光猝灭,但当供体/受体对的任何肽键断裂就会释放出荧光,此荧光可被连续检测,从而可对酶的活性进行定量分析。

 

FRET 肽可作为各类酶研究的合适底物,比如:

1. 肽酶、蛋白酶、激酶、磷酸酶的动力特征和功能特征。

2. 对新的蛋白水解酶的筛选和检测。

3. 对多肽折叠的构象研究。




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